كيف تختار الحيوانات المستنسخة؟

2025 مؤلف: Stanley Ellington | [email protected]. آخر تعديل: 2025-01-22 15:51

متي اختيار أ استنساخ تأكد من أن الجذور قوية وبيضاء وبارزة بفارغ الصبر من وسط النمو. إذا كانت الجذور بنية اللون وذبلت ، أو بدت غير نشطة بأي طريقة أخرى ، أعدها وابحث عن واحدة أفضل.

الى جانب ذلك ، كيف يمكنك استنساخ خلية واحدة؟

1. عد الخلايا لوضع حوالي 16000 خلية في البئر الأول (A1) من لوحة 96 بئر تحتوي على 200 ميكرولتر من المتوسط.
2. قم بإزالة 100 ميكرولتر من الخلايا التي تحتوي على A1 واخلطها مع B1 ، مع الأنابيب لأعلى ولأسفل 3x للخلط جيدًا قبل إزالة 100 ميكرولتر والخلط مع C1 ، إلخ.

أيضا ، كيف تختار مستعمرة خلايا الثدييات؟ ضع اللوحة تحت المجهر لتحديد صحي غير متمايز المستعمرات . اختر المستعمرات باستخدام ماصة P-20 لتعيين 10ul. بحرص قطف او يقطف أ مستعمرة دون تفريق مستعمرة في واحد الخلايا ، وتحويله إلى طبق 96 بئر مع التربسين. ماصة لأعلى ولأسفل بضع مرات لتفريق مستعمرة.

في المقابل ، كيف تستخدم اسطوانة استنساخ؟

استخدام ملقط متوسط معقم ، التقط أ اسطوانة الاستنساخ . اضغط برفق على الجزء السفلي المسطح من اسطوانة في شحم السيليكون الناعم وإزالته بحركة عمودية مفاجئة. إذا تم القيام به بشكل صحيح ، فسيؤدي ذلك إلى توزيع الشحوم بالتساوي على الجزء السفلي من اسطوانة . تعيين اسطوانة فوق مستعمرة.

كيف تختار المستعمرات لخطوط الخلايا المستقرة؟

يتطلب بروتوكول إنشاء خطوط خلايا مستقرة عدة خطوات كما هو موضح أدناه:

1. قم بإنشاء منحنى القتل لتحديد التركيز الأمثل للمضادات الحيوية.
2. نقل الخلايا مع بناء (ق) البلازميد المطلوب
3. حدد وقم بتوسيع المستعمرات المستقرة متعددة النسيلة.
4. التعرف على الحيوانات المستنسخة الفردية عن طريق التخفيف والتوسع المحدود.