كيف يعمل استنساخ جيبسون؟

2024 مؤلف: Stanley Ellington | [email protected]. آخر تعديل: 2023-12-16 00:13

ال استنساخ جيبسون يتكون Master Mix من ثلاثة إنزيمات مختلفة داخل مخزن مؤقت واحد. كل إنزيم له وظيفة محددة وفريدة من نوعها للتفاعل: T5 Exonuclease - يخلق أحادي الجديلة DNA 3 'عن طريق المضغ مرة أخرى من نهاية DNA 5'. يمكن لشظايا الحمض النووي التكميلية أن تلتحم فيما بعد مع بعضها البعض.

بالنظر إلى هذا ، كيف يعمل جيبسون؟

ال جيبسون طريقة Assembly® هي إجراء استنساخ يسمح باستنساخ جزأين أو أكثر دون الحاجة إلى هضم إنزيم مقيد أو مواقع تقييد متوافقة. بدلاً من ذلك ، يتم دمج النهايات المتداخلة التي يحددها المستخدم في الأجزاء للسماح بالانضمام السلس للأجزاء المجاورة.

وبالمثل ، ما هو موجود في Gibson Assembly Master Mix؟ ال جيبسون الاستنساخ ماستر ميكس يتكون من ثلاثة إنزيمات مختلفة داخل منطقة عازلة واحدة. كل إنزيم له وظيفة محددة وفريدة من نوعها للتفاعل: T5 Exonuclease - يخلق أحادي الجديلة DNA 3 'عن طريق المضغ من نهاية DNA 5'. يمكن لشظايا الحمض النووي التكميلية أن تلتحم فيما بعد مع بعضها البعض.

بهذه الطريقة كيف يعمل مجمع البوابة الذهبية؟

بوابة ذهبية الاستنساخ أو التجمع الذهبي البوابة هو طريقة استنساخ جزيئي تسمح للباحث بتجميع أجزاء متعددة من الحمض النووي في وقت واحد وبشكل مباشر في قطعة واحدة باستخدام إنزيمات تقييد النوع الثاني و T4 DNA ligase. هذه التجمع هو أجريت في المختبر.

كيف يعمل استنساخ البوابة؟

ال استنساخ البوابة تعتمد التكنولوجيا على نظام إعادة التركيب الخاص بالموقع الذي تستخدمه العاثية لدمج الحمض النووي الخاص بها في E. موقعي AttL و attR المحيطين بموقع إعادة تجميع الحمض النووي الملتهب المُدرج - تحديدًا أثناء حدث الختان لإصلاح موقع attP في العاثية l و AttB في E.