جدول المحتويات:

كيف تقوم بإدخال جين في البلازميد؟
كيف تقوم بإدخال جين في البلازميد؟

فيديو: كيف تقوم بإدخال جين في البلازميد؟

فيديو: كيف تقوم بإدخال جين في البلازميد؟
فيديو: ماهوالبلازميد؟ شرح plasmid 2024, شهر نوفمبر
Anonim

الخطوات الأساسية هي:

  1. قطع فتح بلازميد و "لصق" في ملف الجين . تعتمد هذه العملية على إنزيمات التقييد (التي تقطع الحمض النووي) و DNA ligase (الذي ينضم إلى الحمض النووي).
  2. إدراج ال إلى البلازميد بكتيريا.
  3. يكبر الكثير من بلازميد - حمل البكتيريا واستخدامها "كمصانع" لصنع البروتين.

أيضا ، كيف يمكن إدخال الجين في GCSE البلازميد؟

هو يتم إدخاله في البلازميد باستخدام إنزيمات ligase. ال بلازميد يذهب إلى خلية بكتيرية. تتكاثر البكتيريا المعدلة وراثيا ، مما يؤدي في ملايين البكتيريا المتطابقة التي تنتج الأنسولين البشري.

بالإضافة إلى ذلك ، كيف يمكنك استنساخ الجين الفرعي؟ الخطوات الأساسية لـ استنساخ ثانوي تقوم بتحرير وتنقية الإدخال الخاص بك من المتجه الأم ، وربط هذا الإدخال في ناقل وجهة مُجهز ، وتحويل تفاعل الارتباط هذا إلى خلايا بكتيرية مختصة. ثم تقوم بفحص الخلايا المحولة للإدراج.

مع أخذ ذلك في الاعتبار ، ما هي الخطوات الأربع لاستنساخ الجينات؟

في البروتوكولات التقليدية لاستنساخ إنزيم التقييد واستنساخ الربط ، يتضمن استنساخ أي جزء من الحمض النووي بشكل أساسي أربع خطوات:

  • عزل الحمض النووي محل الاهتمام (أو الحمض النووي المستهدف) ،
  • ربط
  • تعداء (أو التحول) ، و.
  • إجراء الفرز / الاختيار.

كيف يمكنك تضخيم البلازميد؟

طريقة تجريبية

  1. قم بتشغيل PCR وتنقية منتج PCR: قم بتشغيل PCR لتضخيم إدخال الحمض النووي الخاص بك.
  2. هضم الحمض النووي الخاص بك:
  3. اعزل المُدخل والناقل عن طريق تنقية الهلام:
  4. اربط الإدخال الخاص بك في المتجه الخاص بك:
  5. تحويل:
  6. عزل البلازميد النهائي:
  7. تحقق من البلازميد الخاص بك عن طريق التسلسل:

موصى به: