لماذا لا يتم قطع إنزيم التقييد؟

2024 مؤلف: Stanley Ellington | [email protected]. آخر تعديل: 2023-12-16 00:13

يمكن أن يكون هناك العديد من الأسباب المختلفة التي تجعلك إنزيم التقييد لا يقطع الحمض النووي كما تمت مراجعته في هذا الفيديو. تحضير الحمض النووي المراد قطعه يجب أن تكون خالية من الملوثات مثل الفينول أو الكلوروفورم أو الكحول أو EDTA أو المنظفات أو الأملاح الزائدة ، والتي يمكن أن تتداخل مع انزيم التقييد نشاط.

في هذا الصدد ، لماذا لا تقطع الإنزيمات المقيدة الحمض النووي البكتيري؟

بكتيريا لديك أنزيمات التقييد ، وتسمى أيضا نوكليازات تقييد ، أي يقطع المزدوج تقطعت بهم السبل الحمض النووي في نقاط محددة إلى شظايا. ومن المثير للاهتمام، أنزيمات التقييد لا تشقهم الحمض النووي . بكتيريا منع الخاصة بهم الحمض النووي من التقطيع انزيم التقييد من خلال مثيلة تقييد المواقع.

قد يتساءل المرء أيضًا ، أين تقطع إنزيمات التقييد؟ انزيم التقييد الأنواع بشكل عام ، النوع الأول قطع الانزيمات الحمض النووي في مواقع بعيدة عن تسلسل التعرف ؛ النوع الثاني يقطع الحمض النووي داخل تسلسل التعرف أو بالقرب منه ؛ النوع الثالث يقطع الحمض النووي بالقرب من تسلسل التعرف ؛ والنوع الرابع يشق الحمض النووي الميثلي.

وبالمثل ، يُسأل ، ماذا يحدث إذا أضفت الكثير من إنزيم التقييد؟

قد يحدث هضم غير كامل عند الكثير أو جدا القليل إنزيم يستخدم. ال وجود الملوثات في ال عينة الحمض النووي علبة تعيق الانزيمات ، مما يؤدي أيضًا إلى الهضم غير الكامل. بعض أنزيمات التقييد تتطلب عوامل مساعدة للنشاط الكامل.

لماذا لا يعمل ملخص التقييد الخاص بي؟

غير مكتمل أو لا الهضم بسبب نشاط الإنزيم المحظور بواسطة مثيلة الحمض النووي. إذا كان إنزيمك نشطًا و يهضم السيطرة على الحمض النووي و ال يتم إعداد التفاعل باستخدام الظروف المثلى ، لكنك لا تزال ترى مسائل مع الهضم ، قد يكون ذلك بسبب ال يتم تثبيط الإنزيم عن طريق مثيلة ال قالب DNA.