ما هو الغرض من استخدام ddNTPs؟

2024 مؤلف: Stanley Ellington | [email protected]. آخر تعديل: 2023-12-16 00:13

DdNTP يعود الى ديديوكسينوكليوتيدات ثلاثي الفوسفات الذي يستخدم في طريقة سانجر ديديوكسي لإنتاج أطوال مختلفة من خيوط الحمض النووي لتسلسل الحمض النووي. ينتج عن هذا إنهاء عملية بلمرة الحمض النووي (أو استطالة الحمض النووي) لأن هذه العملية تحتاج إلى مجموعة 3'-OH للاستمرار.

لذلك ، لماذا تُستخدم ddNTPs في التسلسل؟

ديديوكسينوكليوتيدات هي مثبطات استطالة السلسلة من بوليميريز الحمض النووي ، تستخدم في طريقة سانجر للحمض النووي التسلسل . لا تحتوي dideoxyribonucleotides على مجموعة هيدروكسيل 3 بوصات ، وبالتالي لا يمكن أن يحدث استطالة أخرى في السلسلة بمجرد أن يكون هذا dideoxynucleotide على السلسلة. هذا يمكن أن يؤدي إلى إنهاء الحمض النووي تسلسل.

وبالمثل ، هل يتم إرفاق ddNTPs بـ dNTPs؟ واحد أو أكثر من dNTPs تم تصنيفها إشعاعيًا للمساعدة في تصور منتجات النسخ المتماثل. أخيرًا ، يحصل كل أنبوب على واحد من أربعة نيوكليوتيدات خاصة تسمى ديديوكسينوكليوتيدات ( ddNTPs ). ومع ذلك ، بمجرد الدمج ، لا يمكن لبوليميراز الحمض النووي أن يمد السلسلة أكثر لأنه يحتاج إلى 3'-OH يربط إلى النوكليوتيدات التالية.

وبالمثل قد يتساءل المرء ، كيف توقف ddNTPs رد فعل التسلسل؟

عندما تكون موجودة بكميات صغيرة في تفاعلات التسلسل ، ديديوكسيريبونوكليوسيد ثلاثي الفوسفات ( ddNTPs ) إنهاء رد فعل التسلسل في مواقع مختلفة في خيوط الحمض النووي المتنامية. ddNTPs توقف رد فعل التسلسل لأنها: تتسبب في سقوط بوليميراز الحمض النووي من حبلا القالب. ج.

ما هي التقنية التي يمكن أن تستخدم Dideoxynucleotides؟

تسلسل سانجر هو ملف طريقة لتسلسل الحمض النووي على أساس التضمين الانتقائي لإنهاء السلسلة ديديوكسينوكليوتيدات بواسطة بوليميراز الحمض النووي أثناء تكرار الحمض النووي في المختبر. طوره فريدريك سانجر وزملاؤه في عام 1977 ، وكان الأكثر انتشارًا تستخدم التسلسل طريقة لما يقرب من 40 عامًا.